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Los niveles de glucosa en sangre no fueron bajados adecuadamente en los ratones alimentados de HFD después de la inyección de insulina. Para calcular la base corregida inversa AUC, los niveles de glucosa basal momento here se resta de todos después de obtenidos los niveles de glucemia para cada ratón individualmente.

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Suplementario Figura 1. Lista de verificación para la preparación del experimento de. Haga clic aquí para descargar este archivo. Suplementario Figura 2.

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Los niveles de insulina durante servicio. Como se esperaba, los ratones HFD exhibieron niveles fuertemente creciente de la insulina basal en comparación con el grupo de control.

Con la alta prevalencia de diabetes https://hoofdpijn.tabletas.press/3693.php enfermedades asociadas en la población mundial, hay una necesidad para la investigación abordando el mecanismo molecular, prevención y tratamiento de la enfermedad El protocolo presentado describe métodos bien establecidos para la generación de ratones HFD, un robusto modelo animal utilizado para la investigación metabólica, así como la conducción índice de disposición ogtt diabetes la OGTT y ITT, que son potentes herramientas para la evaluación de las alteraciones metabólicas de todo el cuerpo como resistencia a la insulina.

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Los investigadores deben ser conscientes que las respuestas neuroendocrinas a hipoglucemia, la secreción de insulina, acción de la insulina así como índice de disposición ogtt diabetes fenotipo metabólico general dependen fuertemente del fondo genético de los ratones Precauciones durante el diseño experimental incluyen pruebas de ratones de edad comparable, como disminución de la sensibilidad de insulina con edad de 24 y llevar a cabo los experimentos en ratones del mismo sexo.

Como tratamientos y las mutaciones genéticas pueden provocar diversos fenotipos dependiendo de sexo 2526también puede ser aconsejable investigar ambos sexos por separado uno del otro.

El método de muestreo de sangre descrito en el presente Protocolo no requiere anestesia, que puede influir en la frecuencia cardíaca, flujo sanguíneo y metabolismo de la glucosa, produciendo resultados no fisiológico Alternativamente, puede ser necesario implantar un catéter arterial, que permite el muestreo vascular sin manejar el estrés durante el experimento, pero también índice de disposición ogtt diabetes esfuerzo, costes índice de disposición ogtt diabetes como el riesgo de pérdida de animales para el experimento.

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An unexpected error occurred. Issue doi: Nagy, C. Click here for the english version. For other languages click here.

A pesar de progresos considerables en la comprensión del metabolismo de la glucosa, los mecanismos moleculares de la regulación en salud y la enfermedad siguen bajo investigación, mientras que se necesitan urgentemente nuevos enfoques para prevenir y tratar la diabetes. Sobrealimentación disparadores meta-inflamación crónica, que conduce a alteraciones índice de disposición ogtt diabetes la insulina periférica asociado a receptor de señalización y por lo tanto reduce la sensibilidad a la disposición de glucosa mediada por insulina.

Estos eventos resultan en elevados de glucosa en ayunas y los niveles de insulina así como una reducción índice de disposición ogtt diabetes la tolerancia a la glucosa, que a su vez sirven como indicadores importantes de resistencia a la insulina.

Aquí, presentamos un protocolo para la generación y caracterización metabólica de la dieta alta en grasas HFD -alimentó ratones como modelo frecuente de resistencia a la insulina inducida por la dieta.

Ilustramos detalladamente la prueba de tolerancia oral a la glucosa OGTTque supervisa la disposición periférica de índice de disposición ogtt diabetes secreción de insulina y carga de glucosa por vía oral con el tiempo. Estos métodos y sus aplicaciones posteriores constituyen herramientas poderosas para caracterizar el fenotipo metabólico general de ratones, así como para evaluar específicamente alteraciones en el metabolismo de la glucosa.

Insulina y sus hormonas contador-reguladoras glucagón please click for source como los principales reguladores del equilibrio oferta y macronutrientes energía celular, manteniendo así también sangre sistémica adecuada glucosa concentraciones 2.

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Una amplia gama de modelos animales con inducción genética, nutricional o experimental de la enfermedad han demostrado para ser excelentes herramientas para el estudio de los mecanismos moleculares de resistencia a la insulina índice de disposición ogtt diabetes varias formas de diabetes, así como sus enfermedades acompañantes 7.

Los protocolos descritos pueden ser herramientas muy poderosas para investigar la influencia de la genéticas, farmacológicos, dieta y otros factores ambientales sobre el metabolismo de la glucosa de todo el cuerpo y sus enfermedades asociadas como resistencia a la insulina.

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Tenga en cuenta que todos los procedimientos descritos en este protocolo sólo deben realizarse después de la aprobación institucional y gubernamental, así como por el personal que es técnicamente competente. Nota: Las mismas precauciones índice de disposición ogtt diabetes para OGTT manejo de ratones, sangre, glucómetro y uso de la jalea de petróleo también deban aplicarse cuando se realiza la ITT.

Para la ITT, la posterior recogida de muestras de sangre con tubos capilares es opcional.

La figura índice de disposición ogtt diabetes muestra un esquema horario para fenotipado metabólico de ratones con una dieta. En una edad de aproximadamente 6 semanas, los ratones deben colocarse en un HFD, mientras que un grupo de LFD puede servir como el grupo de control.

Cualquier tipo de estrés p. Cada cohorte de ratones para los experimentos de la dieta debe consistir de al menos 10 ratones porque estos experimentos de dieta son lentos, y afloramientos son frecuentes por ejemploratones no ganando peso o ratones con niveles de insulina o glucosa anormal. Después del período seleccionado de tiempo dependiendo de la hipótesis del estudio y el momento de los cambios esperadospueden realizarse para la evaluación de la índice de disposición ogtt diabetes de insulina y la tolerancia de la glucosa OGTT y ITT.

En este trabajo, se eligieron momentos finales para la prueba metabólica. Importante, debe haber índice de disposición ogtt diabetes more info de recuperación de al menos 1 semana entre la OGTT y ITT como estos experimentos conducen a la pérdida sustancial de sangre y por lo tanto son muy estresantes para los ratones.

El consumo de HFD dio lugar a un aumento significativo en el peso corporal como se muestra en la figura 4. A las 6 semanas de edad, el peso del cuerpo fue 20,2 g en ambos grupos.

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Como el volumen de sangre es limitado en pequeños roedores, un ensayo de point-of-care POC para los seres humanos diabéticos glucómetro fue utilizado para monitorear niveles de glucosa en sangre durante los experimentos de fenotipado metabólico. Figura 5 presenta el curso temporal de insulina absoluta y absoluta glucosa figura 5a — b figura 5 c niveles durante la OGTT. Mientras que los niveles de insulina estaban casi sin cambios en el grupo control, los ratones índice de disposición ogtt diabetes un HFD demostraron fold elevados en comparación con el grupo de control, así como una respuesta grandemente creciente de la insulina, indicando HFD-inducida de la hiperinsulinemia compensatoria como el ayuno un intento de contrarrestar la capacidad de eliminación disminuida de la glucosa, que índice de disposición ogtt diabetes ser causada por resistencia a la insulina.

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En este ensayo, el grado a que la sangre las concentraciones de glucosa caen después de la administración de insulina índice de disposición ogtt diabetes la eficacia de la acción de la insulina de todo el cuerpo. Los ratones alimentados de HFD mostraron una reducción deterioro de niveles de glucosa en sangre en comparación con el grupo de control alimentado por la LFD, en todos los puntos de tiempo en el ITT, por lo tanto, lo que sugiere resistencia a la insulina.

Si los grupos que se comparan tienen similar ayuno niveles de glucosa en sangre que no es el caso de este experimentolos niveles de glucosa durante ITT pueden presentarse como el porcentaje de glucosa basal. Durante HFDs y posterior metabólicos experimentos fenotípicos, afloramientos pueden ocurrir con frecuencia. En este estudio, como ejemplo nos demostró interpretar datos de metabólicas experimentos en índice de disposición ogtt diabeteshabía realizado en ratones con obesidad inducida por dieta, intolerancia a la glucosa y resistencia a la insulina y compararon con un grupo control con peso corporal normal.

Figura 1.

Esquema horario para un régimen de dieta sugerida y índice de disposición ogtt diabetes experimentos en vivo. Para investigar los efectos metabólicos de HFD en ratones, los animales del grupo experimental se colocan en HFD en aproximadamente 6 semanas de edad, mientras que el grupo de control recibe un LFD.

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El peso corporal this web page los ratones debe determinarse sobre una base semanal para evaluar ganancia de peso adecuada.

Después de aproximadamente 12 semanas de dieta o un punto de tiempo seleccionado dependiendo de la hipótesis de investigaciónel fenotipo metabólico de los ratones es evaluado por un OGTT seguido de 1 semana de tiempo de índice de disposición ogtt diabetes y posteriormente un ITT. Figura 2. Métodos para el muestreo de sangre durante los experimentos metabólicos. Para la usa, así como por la ITT, donde se requiere tomar muestras de sangre repetidas, se recomienda extraer sangre mediante corte con cuidado un pedazo de mm de la punta de la cola con unas tijeras afiladas variante Aseguido por la determinación de niveles de glucosa en sangre con un glucómetro y mayor colección de la sangre con un capilar para determinar los niveles de insulina y otros valores relevantes de la sangre.

Alternativamente, sangre también podría ser muestreada a través de la vena de la cola variante B o por cateterización arterial no mostrado. Figura 3. Sonda oral de glucosa a y la inyección de insulina intraperitoneal b. Ver protocolo para una descripción detallada.

Figura 4. Mientras que los ratones en HFD mostraron un aumento esperado en el peso corporal, especialmente en las índice de disposición ogtt diabetes semanas de dieta, LFD-alimentó los ratones mostraron peso corporal casi constante durante el período observado.

Figura 5. Los niveles de glucosa en el grupo de HFD fueron elevados en índice de disposición ogtt diabetes estado de ayuno, así como después de glucosa.

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Índice de disposición ogtt diabetes ratones no sólo compensadas la inyección de glucosa con un mayor incremento en los niveles de insulina de la sangre, también inició y terminó la OGTT con niveles de insulina elevados en comparación con el grupo de control.

Figura 6. Los niveles de glucosa en sangre no fueron bajados adecuadamente índice de disposición ogtt diabetes los ratones alimentados de HFD después de la inyección de insulina. Para calcular la base corregida inversa AUC, los niveles de glucosa basal momento 0 se resta de todos después de obtenidos los niveles de glucemia para cada ratón individualmente.

Como consecuencia del mayor nivel de glucosa en ratones alimentados con HFD durante OGTT, la línea de base corregido inversa que AUC fue menor en los ratones alimentados de HFD en comparación con ratones control, que sugirieron la sensibilidad de insulina disminuida.

Suplementario Figura 1. Lista de verificación para la preparación del experimento de.

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Haga clic aquí para descargar este archivo. Suplementario Figura 2. Los niveles de insulina durante servicio. Como se esperaba, los ratones HFD exhibieron niveles fuertemente creciente de la insulina basal en comparación con el grupo de control. Con la alta prevalencia de diabetes y enfermedades asociadas en la población mundial, hay una necesidad para la investigación abordando el mecanismo molecular, prevención y tratamiento índice de disposición ogtt diabetes la enfermedad El protocolo presentado describe métodos bien establecidos para la generación de ratones HFD, un índice de disposición ogtt diabetes read more animal utilizado para la investigación metabólica, así como la conducción de la OGTT y ITT, que son potentes herramientas para la evaluación de las alteraciones metabólicas de todo el cuerpo como resistencia a la insulina.

Mientras que la glucosa sirve como el principal estímulo para la secreción de insulina en un OGTT, el protocolo presentado puede ser modificado por co- aplicar otras sustancias como otros macronutrientes y las hormonas que se saben que modificar la respuesta de insulina 2.

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Del mismo modo, el protocolo ITT puede modificarse por la aplicación co- de otras sustancias p. Los investigadores deben ser conscientes que las respuestas neuroendocrinas a hipoglucemia, la secreción de insulina, acción de la insulina así como el fenotipo metabólico general dependen fuertemente del fondo genético de los índice de disposición ogtt diabetes Precauciones durante el diseño experimental incluyen pruebas de ratones de edad comparable, como disminución de la sensibilidad de insulina con edad de 24 y llevar a índice de disposición ogtt diabetes los experimentos en ratones del mismo sexo.

Como tratamientos y las mutaciones genéticas pueden provocar diversos fenotipos dependiendo de sexo 2526también puede ser aconsejable investigar ambos sexos por separado uno del otro. El método de muestreo de sangre descrito en el presente Protocolo no requiere anestesia, que puede influir en la frecuencia cardíaca, flujo sanguíneo y metabolismo de la glucosa, produciendo resultados no fisiológico Alternativamente, puede ser necesario implantar un catéter arterial, que permite el muestreo vascular sin manejar el estrés durante el experimento, pero también agrega esfuerzo, costes así como el riesgo de pérdida de animales para el experimento.

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Como los ritmos circadianos tiene un fuerte efecto sobre el metabolismo de glucosa sistémica 28índice de disposición ogtt diabetes importante considerar en qué momento del día se llevan a cabo los experimentos descritos aquí. La ruta descrita de administración también puede variar dependiendo de la hipótesis específica siendo probada.

Excursiones de glucosa e insulina significativamente diferencian dependiendo de la ruta de entrega solicitadas.

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Asimismo, la administración de glucosa intravenosa se caracteriza por una respuesta de insulina retrasada Por otra parte, la glucosa los niveles se pueden medir en las muestras del plasma recogidas, por ejemplopor totalmente automatizado analizadores de química en los laboratorios rutinarios. Si gluconeogénesis necesita ser evaluado, puede aplicarse la prueba de tolerancia a piruvato PTTque es otra variante de los protocolos descritos aquí, monitoreo glucémico excursiones después de la administración de un bolo de piruvato Esta investigación fue apoyada por el fondo científico médico del alcalde de la ciudad de Read article y la Índice de disposición ogtt diabetes Gesellschaft für Laboratoriumsmedizin und Klinische Chemie.

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